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裸鼠成瘤實驗

簡要描述↟╃◕✘:裸鼠成瘤實驗是腫瘤研究中最常用的實驗╃·,常用免疫缺陷型小鼠來作為移植瘤模型的載體╃·,透過對該小鼠的注射腫瘤細胞╃·,使其成瘤╃·,觀察流體的生長來判斷其生物學變化▩│✘▩。

  • 更新時間↟╃◕✘:2022-09-08 00:00:00
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詳細介紹

1▩••、細胞的狀態是成瘤實驗的關鍵,所以細胞生長狀態-定要好,取處於對數生長期的細胞,細胞達80-90%左右密度為宜▩│✘▩。收集細胞前一天晚上更換新鮮培養基▩│✘▩。
2▩••、胰酶消化細胞後用預冷的PBS洗兩遍,目的為去除細胞中殘餘的血清▩│✘▩。
3▩••、用PBS或者無血清培養基吹打細胞沉澱至合適的濃度, -般皮下瘤接種的細胞量為1-5x10^6個細胞/支,接種體積為0.1-0.2ml ,因此細胞懸液的濃度為1-5x 10^7個細胞/ml╃·,如若有條件的實驗室╃·,也可以加基質膠以加速瘤塊的生成,基質膠與PBS或無血清的比列為1:1▩│✘▩。
4▩••、細胞消化後應儘快接種到裸鼠皮下, - -般儘量在半小時內完成(如果接種量大,可以分批接種) , 途中將細胞懸液放在冰上降低細胞的代謝以保持細胞的活性▩│✘▩。
5▩••、選擇的裸鼠一般在4-6周齡 ,體重16-18g左右,種植部位選擇血供豐富區域,如腋窩中後部▩│✘▩。
6▩••、接種前用槍將細胞懸液充分的吹散,防止細胞成團而降低細胞成活率,姐導致小鼠接種細胞數量的差異過大▩│✘▩。
7▩••、接種時,針頭在皮下進針深一點,約1cm深,針頭在皮下左右滑動幾次,以便細胞接種成團,減少注射後細胞懸液從針眼溢位▩│✘▩。
8▩••、接種後1-2周左右可以見到皮下開始出現腫塊▩│✘▩。
9▩••、根據腫瘤細胞的特性和接種細胞的量,一般皮 下成瘤的週期為1-2個月▩│✘▩。腫瘤不宜生長過大,一般不要超過2000mm3▩│✘▩。
10▩••、腫瘤大小測量一般為1周兩次 ,遊標卡尺測量腫瘤最長和最短部位▩│✘▩。V= 1/2*a*b2 (a為長軸╃·,b為短軸)▩│✘▩。
 

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